植物蔗糖酶（sucrase）试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
测定意义：
蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的关键酶之一，能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。
测定原理：
本试剂盒采用 3.5－二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是 3.5－二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、沸水浴、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存，用时每瓶加入 5mL 蒸馏水充分溶解，现配先用；试剂三：液体 5mL×1 瓶，常温保存；
样品测定的准备：
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
加样表和测定步骤：
| 试剂名称（μL） | | 对照管 | | 测定管 |
| 试剂一 | | 50 | | 50 |
| 蒸馏水 | | 100 | | |
| 样本 | | | | 100 |
| 试剂二 | | 50 | | 50 |
| | | 置于 25℃准确水浴 10min | | |
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| 试剂三 | 100 | | 100 | |
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| 混匀， 100℃水浴 5min 左右（盖紧，防止水分散失），冷却至室温 | ||||
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| 蒸馏水 | 700 | | 700 | |
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混匀，520nm 蒸馏水调零，测定各管吸光值，ΔA=A 测定-A 对照，对照管只要做一管。
蔗糖酶活力计算：
1、标准条件下测定的回归方程为 y = 0.1296x -0.12；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。2、按照蛋白浓度计算单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
蔗糖酶活力(μg/mg prot)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(V1×Cpr)÷T=771×(ΔA +0.12)÷Cpr。3、按样本鲜重计算单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
蔗糖酶活力(μg/g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=771×(ΔA +0.12) ÷W。1000：1mg/mL=1000μg/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，
1mL；T：反应时间，10min； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。
