免疫鉴定法是利用中药含有的特异蛋白为抗原制备的特异抗体，与供试品中特异抗原结合产生沉淀反应的一种方法。它是通过制备特异抗原试剂，采用免疫电泳(immuno—electrophoresis)或琼脂免疫扩散等方法达到鉴定目的的。本方法具有专属性强的特点，适用于中药的品质鉴别。它涉及的相关技术主要有血清学方法、药理学方法、受体学方法、免疫化学方法、酶联免疫法、免疫印迹法等。其中利用中药含有多糖类、蛋白质等具有抗原决定簇的大分子，用它们制成特异性抗体(抗血清)进行中药鉴定，是一种具有高度选择性的血清学鉴定方法。血清学鉴定法可用于来源科以上到种以下各分类等级的药用动植物分类，也可以用于药用动植物的亲缘关系研究。血清学鉴定特征的研究对中药复方制剂的鉴定具有适用性和重要价值。血清学鉴定法中比较重视免疫印迹法(immuno blotting)。该法既可原位转印电泳区带，协助确证中药特征抗原分布，也可把待鉴别供试品点在硝酸纤维素膜上，直接进行斑点酶联免疫吸附测定法(dot—ELISA)鉴别。该方法的缺点是：实验周期长，所需动物量大，特异性高的抗体不易制备；免疫血清属于多克隆抗体，存在交叉反应，干燥中药各种蛋白的降解较难解决。电泳(elctrophoresis，EP)是一种分离和鉴定混合物中带电离子的技术，其原理是利用中药含有蛋白质带电荷的成分，在同一电场作用下，由于各组分所带电荷的性质、电荷数目以及分子质量不同，而泳动方向和速度不同，在一定时间内，各成分的泳动率不同，结合谱带数和染色不同达到鉴定的目的。本方法用于含有蛋白质、多肽和酶类等中药的鉴定，其特点是快速、准确、专属性强、灵敏度高、重现性好。鉴定对象多数为动物药类，植物药的果实和种子类、部分根及根茎类中药，以及含有上述成分的中成药。常用的方法有SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电点聚焦凝胶电泳、不连续性聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、区带毛细管电泳、胶束毛细管电泳等。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)具有机械性能好、与被分离物质不起反应、对pH值和温度变化较稳定、重复性好、灵敏度高等优点。聚丙烯酰胺凝胶电泳是由丙烯酰胺和N，N一亚甲基双丙烯酰胺在催化剂作用下聚合交联成三维网但其缺点是标记不能用3HzO，而需用3Hz，因此要在真空条件下标记，需要一定的条件和设备。而131I的半衰期较短，因此，在放射免疫分析时，常用125I来标记抗原。以下仅以125I标记抗原进行说明。放射性碘化标记技术可分为两类：一类是肽、蛋白质和酶类，可以直接进行碘化标记，即直接将125I连接到被标记分子的酪氨酸残基上的羟苯基上；另一类是甾体类化合物、环核苷酸、前列腺素等小分子化合物，因缺乏可供碘标记的部分，多用间接碘化标记法，即把碘标记后的配位体连接到被标记抗原的氨基、羧基和羟苯基上。固相系指预先将抗体与固体颗粒或固体表面结合，形成不溶解但仍保持抗体的特异性结合能力。当被测物、标记物的溶剂加至固相抗体中，经反应后，液相中的标记物被结合到固相支持物上，洗去未结合的标记物，即可将B相和F卡H分离。固相法简便、快速，从而已经发展成为了一种固相放射免疫分析方法。反应液一每管加入羊抗兔IgG羧化聚苯乙烯乳胶结合的免疫微球lmL(加前振摇)一37℃水浴15min，离心20min(4000r／min)一立即去除上清液(F相)，测定沉淀物(B相)5．微孑L薄膜分离微孔薄膜是一种具有一定孑L径的特殊过滤膜，直径0。25mm，微孔直径≤\0．45肛m，一般多采用孔径为0．25肛m的。将反应后的溶液放入装有微孔薄滤器上，经抽滤后，标记物如系小分子化合物，则被滤出，而大分子的复合物被吸附在微孔薄膜的表面。从而将F相和B相分离。