悬滴法 泳衣观察细菌的形态及动力。

1、区凹玻片，于凹窝周围涂抹凡士林少许。

2、在盖玻片中央放一接种环细菌的肉汤培养物（或将少许固体培养物混悬于一滴生理盐水中）。

3、将凹玻片翻转，使凹窝对准盖玻片中央并盖于其上，然后翻转玻片，以小镊子或接种环柄轻加压力，使盖玻片与凹窝周围黏紧。如无凹玻片时，也可于载玻片适当位置加凡士林，其中垫以其他物体，然后使盖玻片重叠于玻片之上。

4、将制备好的悬滴标本置于显微镜载物台中央，先以低倍镜找到悬滴的边缘以后，在换高倍镜观察。

5、有鞭毛的细菌在液体中运动活泼；无鞭毛的细菌仅有位置不变的布朗运动。

   压滴法（用途同悬滴法）

1、用接种环取菌液（获奖少许固体培养物混悬于一滴生理盐水中）2-3环，置于载玻片中央；

2、用内资加好盖玻片，覆盖于菌液上。在放置时，先使盖玻片一边接触菌液，缓缓放下，以不产生气泡为佳。

3、先以低倍镜找好位置，在意高倍镜或油镜观察。

革兰染色法

革兰染色法（Gramstain)是丹麦细菌学家革兰于1884年发明，可将细菌鉴别为革兰阳性菌、革兰阴性菌两大类。至今已逾百年，但人在广泛使用，是细菌学中最为经典的染色法。

一般认为，革兰染色的原理是由于格兰阳性菌和阴性菌的细胞壁机构与化学组成不同。革兰阳性菌的细胞壁较厚，肽聚糖含量多，且交联度大，脂类含量少，经95%乙醇脱色时，肽聚糖层的孔径变小，通透性降低，结晶紫-碘复合物不易被脱掉而保留紫色；革兰阴性菌的细胞壁较薄，含有较多的类脂质，而肽聚糖的含量较少，乙醇脱色时溶解外层类脂质，致使细胞壁通透性增高，结晶紫-碘复合物容易被乙醇溶解而脱色，经复染后呈红色。

制标本片

1、图片：取一接种环生理盐水放于载玻片的一段，挑少许变性杆菌或葡萄球菌培养物与盐水混匀，土城直径约1cm的图片，涂片应薄而均匀。

2、干燥：图片放置室温中，待其自然干燥。

3、固定：标本干燥后，手执玻片的一段标本面向上，通过究竟灯火焰三次，约2-3s（玻片反面触及皮肤，以不烫为度，以杀死细菌并使之固定于玻片上），待冷却后染色。

染色 将治好的标本片按下列步骤进行染色；

1、滴加结晶紫染液初染1min，水洗。

2、滴加卢戈氏碘液媒染1min，水洗。

3、滴加95%乙醇脱色，摇动玻片0.5-1min，水洗。

4、滴加稀释付红染液复染0.5-1min，水洗，洗水纸吸干后镜检。

实验结果；标本片滴香柏油一滴，用油镜观察，呈紫色的为格兰阳性菌，呈红色的为革兰阴性菌。