在研究植物生命过程中，常常需要准确了解某一些激素的含量，以及个激素间的比例，因此，植物内源激素的提取、分离、测定是植物生理学实验技术中机器重要的内容。
植物激素（Planthormone)免疫定量主要有放射免疫分析（RIA)和没联系福面议分析（elisa），由于前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一种类型。在ELISA中，抗原抗体反应的检测依靠酶标记物来实现，常用的酶有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶。酶可直接标记激素分子，成为酶标植物激素，称为酶标植物激素，也可标记于第二抗体（识别抗激素抗体Fc片段的抗体获金黄色葡萄球菌A蛋白），称为酶标二抗。这两类标记物分别用于固相抗体型和固相抗原性ELISA。
A .固相抗原型ELISA；将抗激素的但可控抗体(MAb）与一吸附于固相载体上的兔抗鼠Ig抗体（RAMIG)结合，然后加入激素标准品或待测样品，时期与固相化的MAb结合，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记激素（酶标激素）。通过测定酶标激素的被结合量，可换算除未知样品中激素的数量。
B.固相抗原性ELISA；将“激素-蛋白”复合物（该蛋白应不同于免疫原中的载体蛋白）包被于固相载体，加入待测激素（样品或标准品）和抗IAA多克隆抗体（PAb)反应，进行竞争反应。然后让HRP标记羊抗兔Ig抗体（HRP-GARIG)与结合的固相上的PAb反应，通过测定与固相结合的酶量，换算出未知样品中激素的含量。
实例：
材料：高等植物、真菌、藻类等组织或器官。
仪器：酶联免疫检测仪、高速冷冻离心机、恒温箱、连续进样器、涡旋仪。96孔微孔板、离心管、研钵、或匀浆器、试管、剪刀、天平（0.0001g）、液氮罐、水浴锅、氮气装置、试管架、橡胶管、注射针头、C18柱。
试剂：洗涤缓冲液：0.01mol/L PH7.4磷酸缓冲液（PBS),含0.05%Tween-20 、PBS:8.0gNaCl、0.2gNaCl、0.2gKH2PO4、2.96gNa2HPO4·12H2O荣誉100ml蒸馏水中；
RAMIG溶液或“激素-蛋白”复合物;
0.1%封闭蛋白（该蛋白应不同于免疫原中的载体蛋白）
抗激素MAb或PAb:
激素标准品木业及残币系类溶液（按双倍或四倍系列稀释）；
HRP标记激素或HRP-GARIG;
邻苯二胺（OPD）基质液：5mgOPD荣誉12.5ml 0.01mol/L PH5.0PBS，用前加入30%H2O212.5ul；
3 mol/L H2SO4;
80%甲醇；
样品稀释液：100mlPBS溶解0.1g白明胶；
1mmol/L二叔丁基对苯酚。
过程
（一）激素的提取
快读称取新鲜的植物材料0.5000g(若取样后不能马上测定，要用液氮速冻0.5-1h后保存于-40℃冰箱中），将样品提取液，冰浴下研磨成匀浆，转入试管，4℃下提取4小时，4000rpm离心15min，取上清液，提取两次那个合并上清液。上清液C18柱，去除干扰物，在40-45℃水浴下用氮气吹干或冷冻干燥。用样品稀释液定容。涡旋器混匀后用于测定。
（二）激素的测定
1、固相抗体型ELISA
（1）、用方阵法滴定选择个反应物最适工作浓度；
（2）、将100ul RAMIG溶液包被聚苯乙烯反应板微孔，4℃湿盒内放置12H
（3）、弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次，甩干；
（4）、加入100ul抗激素MAb溶液，37℃下放置70min；
（5）弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次，甩干
（6）各孔内一次计入50ul待测样液，每个样品3次重复，15-20℃下放置20min
（7）计入5ulHRP标记激素，37℃下放置60min；
（8）弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次，甩干。
（9）加入100ulOPD基质液，37℃显色15-20min，加入50ul 3mol/l H2SO4中止反应。用酶联免疫检测仪测定490nm下各孔的A值，求出每份样品重复孔的平局值。
（10）用激素标准母液和参比系列溶液，在同一微孔板上同上法操作。
2、固相抗原ELISA
(1)、用主阵法滴定选择各反应物最适工作浓度；
(2)将100ul激素-蛋白复合物溶液包被于微孔板，37℃下放置12h
(3)、弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次，甩干；
(4)、加入100ul0.1%封闭蛋白溶液封闭，37℃放置30min。
(5)、弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次，甩干；
(6)、隔空同时加入50ul样液和50ul抗激素PAb溶液，液加入正常兔血清溶液的孔（非特异吸附孔）为空白凋零，37℃下放置60min。
(7)、弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次，甩干。
(8)、加入100ul HRP-GARIG溶液，37℃下放置60min。
(9)、弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗涤3次，甩干；
(10)、随后的显色、终止与比色程序同上。
(11)、用激素标准参比溶液，在同一微孔板上同上法操作。、
固相抗体型ELISA结果计算：
以加入激素母液的孔（非特异吸附孔）为空白凋零，已加入不含激素的PBS的空为B0孔，以加入激素标准参考系列溶液的隔空为Bi孔。以标准激素摩尔数的常用对数log[激素]为横坐标，对应的IN[B1/(Bo-Bi)]为纵坐标 ，可得一条Y=a+bX直线。
将样品孔的A490值带入上式，换算出待测样品中激素摩尔数量，诚意稀释倍数，除以样品重量，即为每克样品的激素含量。
固相抗原型elisa结果计算
以加入不含激素的磷酸缓冲液的孔为Bo孔，以加入激素标准参考系列溶液的各孔为Bi孔。标准曲线计算与结果分析同上。
