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试验中影响核糖核酸自溶的各种因素

点击次数:2371次     发布时间::2019/7/1 16:32:33

 试验中影响核糖核酸自溶的各种因素

温度

高温或低温处理,破坏细菌细胞膜的通透性,可引起RNA的自溶。在大肠杆菌温度敏感性突变株中,因膜的热变性,表在性的RNaseI引起渗入细胞质中的RNA的分解。细菌核糖体的热稳定性与细菌的耐热性之间有平行关系。金色链霉素及大肠杆菌的核糖体,因热破坏,或者是核糖体中的RNase受热活化,都是诱发RNA自溶的重要原因。在解酯假丝酵母中,也可以认为在ATP存在下才起作用的蛋白质RNase抑制剂的受热失活,是导致RNA自溶的主要原因。

照射

虽然大肠杆菌或酵母通过紫外线或X-射线照射都能分泌紫外吸收物质,而RNA自溶确实第二义的现象。

药物

多粘菌素、多烯类抗菌素、表面活性剂、有机溶剂等破坏细胞膜的药物。作用于细菌、酵母、丝状菌时会使紫外吸收物质渗出。特别是胶球似酵母通过SDS处理,能有效分泌3(2)-核苷酸。产元假丝酵母用阳离子表面活性剂处理,分泌5-核苷酸(标准品

在大肠杆菌的培养过程中,若添加链霉素,初期从头合成,后期能分泌源于RNA自溶的5-核苷酸。链霉素诱发分泌核苷酸的机制可以说是由于改变了细胞膜渗透性的结果。卡那霉素及新霉素对大肠杆菌显示与链霉素同样的效果。再者,在枯草杆菌、荧光假单胞菌中可以看到因链霉素作用而分泌核苷酸的现象。但类 链球菌、金色链球菌则没有这种现象

已知用DNA合成抑制剂si裂霉素和AF-5,RAN合成抑制剂放线菌素,具有分解DNA作用的大肠杆菌素E,呼吸抑制剂氟化钠等均有可引起RNA的自溶。但这些物质诱发RNA自溶的机制尚未搞清。

使用EDTA柠檬酸等螯合剂使RNA自溶的现象是由于除去了对膜或核糖体具有稳定作用的Mg所致

在研究产元假丝酵母的RNA自溶现象时,还发现硼酸离子对RNA自溶有促进作用

限制营养

在各种细菌中以观察到,因缺少碳源、氨基酸、氮源、磷酸、Mg、尿嘧啶、鸟嘌呤等及缺乏全营养,会使核糖体或rRNA自溶。关于不同的营养限制条件,都引起核糖体分解的同样结果。Erlich等人认为,限制营养条件是引起核糖体分解的统统信号,并推测了那个信号是细胞内核苷多林算量的减少。其后的很多研究成果,如酵母的核糖体,为ATP所稳定的现象,浓味假单胞菌的RNA自溶与ATP调节的现象。枯草杆菌菌体内的RNase为ATP及ADP所抑制的现象,大肠杆菌菌体内RNaseII受ATP抑制的现象等都不支持Erlich的推论。

盐浓度、PH

许多细菌若在践行缓冲液中保温,就会导致RNA自溶,自溶与否,取决于盐浓度的高低,如中性盐能促进马铃薯疫酶RNA的自溶,盐对RNA自溶的促进作用,是由于盐能增大底物对rRNA分解酶的敏感性。核糖体吸附RNase的能力,会随着盐浓度的增加而减少,与此同时,缺激活了核糖体RNase这些事实暗示核糖体能放生鱼盐浓度有依赖性关系的变性。

在各种酵母中也会发生依赖于PH的RNA自溶现象,一般酵母自溶在酸性条件下,生成3-核苷酸;在碱性条件下生成5-核苷酸

其他因素

通过冷冻干燥、搅拌及其他各种伊苏也会引起RNA的自溶。除分泌吸收紫外的物质外,在不特加以刺激的培养中,生成核苷酸类物质。其生成机制,认为是基于RNA自溶的例子颇多。

 

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