果糖-1,6-二磷酸(Fructose-1,6 Diphosphate，FDP)试剂盒说明书
微量法 100T/48S
测定意义
果糖 1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂，是糖解途的重要中间体，广泛存
在于动植物和微生物体内，能影响胞内钾离子的浓度，改善葡萄糖和其他能物的代谢，
促进组氧的释放，广泛用于临床医药制剂。
测定原理
醛缩催化果糖 1,6-二磷酸降解，产物与 DNPH缩合成紫红色物质，在540nm有特征吸收
峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制
试剂一：液体 105mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体 0.4mL×1支，4℃避光保存。
试剂三：液体 4mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体 16mL×1瓶，4℃保存。
样品处理
1.组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL
试剂一），加入试剂一，冰浴匀浆后于4℃，12000rpm离心10min，取上清待测。
2.细胞：按照胞数（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500
万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔 7秒，
总时间3min）然后 4℃，12000rpm离心 10min，取上清待测。
3.液体：直接检测。
测定操作
对照管测定管
样品（µL）
试剂一（µL）
试剂二（µL）
20
40
4
44
充分混匀，37℃反应30min
试剂三（µL）
试剂四µL
40
充分混匀，37℃温育10min
160
40
160
充分混匀，于 37℃温育 10min，于微石英比色皿/96孔板，蒸馏水
调零，测定 540nm处吸光值，记为 A对照管和 A测定管，△A=A
测定管-A对照管
计算公式
a.用微石英比色皿测定的算公式如下
标准曲线：y=0.6971x+0.0012，R2=0.9983
1．按照质量计算
FDP（mg/g）=(△A-0.0012)÷0.6971×V反总÷（W×V样÷V样总）
=18.94×(△A-0.0012)÷W
2．按照细胞数量计算
FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.6971×V反总÷（W×胞数÷V样总）
=18.94×(△A-0.0012)÷细胞数
3．按照液体体积计算
FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.6971×V反总÷V样
= 18.94×(△A-0.0012)
V反总：反应总体积，0.264mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，
g；V样总：加入提取液体积，1mL
b.用96孔板测定的算公式如下
标准曲线：y=0.3486x+0.0012，R2=0.9983
1．按照质量计算
FDP（mg/g）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷（W×V样÷V样总）
=37.88×(△A-0.0012)÷W
2．按照细胞数量计算
FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷（W×细胞数量÷V样总）
= 37.88×(△A-0.0012)÷细胞数量
3．按照液体体算
FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷V样
= 37.88×(△A-0.0012)
V反总：反应总体积，0.264mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，
g：V样总：加入提取液体积，1mL
订购电话0532-58720157
微量法 100T/48S
测定意义
果糖 1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂，是糖解途的重要中间体，广泛存
在于动植物和微生物体内，能影响胞内钾离子的浓度，改善葡萄糖和其他能物的代谢，
促进组氧的释放，广泛用于临床医药制剂。
测定原理
醛缩催化果糖 1,6-二磷酸降解，产物与 DNPH缩合成紫红色物质，在540nm有特征吸收
峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制
试剂一：液体 105mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体 0.4mL×1支，4℃避光保存。
试剂三：液体 4mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体 16mL×1瓶，4℃保存。
样品处理
1.组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL
试剂一），加入试剂一，冰浴匀浆后于4℃，12000rpm离心10min，取上清待测。
2.细胞：按照胞数（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500
万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔 7秒，
总时间3min）然后 4℃，12000rpm离心 10min，取上清待测。
3.液体：直接检测。
测定操作
对照管测定管
样品（µL）
试剂一（µL）
试剂二（µL）
20
40
4
44
充分混匀，37℃反应30min
试剂三（µL）
试剂四µL
40
充分混匀，37℃温育10min
160
40
160
充分混匀，于 37℃温育 10min，于微石英比色皿/96孔板，蒸馏水
调零，测定 540nm处吸光值，记为 A对照管和 A测定管，△A=A
测定管-A对照管
计算公式
a.用微石英比色皿测定的算公式如下
标准曲线：y=0.6971x+0.0012，R2=0.9983
1．按照质量计算
FDP（mg/g）=(△A-0.0012)÷0.6971×V反总÷（W×V样÷V样总）
=18.94×(△A-0.0012)÷W
2．按照细胞数量计算
FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.6971×V反总÷（W×胞数÷V样总）
=18.94×(△A-0.0012)÷细胞数
3．按照液体体积计算
FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.6971×V反总÷V样
= 18.94×(△A-0.0012)
V反总：反应总体积，0.264mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，
g；V样总：加入提取液体积，1mL
b.用96孔板测定的算公式如下
标准曲线：y=0.3486x+0.0012，R2=0.9983
1．按照质量计算
FDP（mg/g）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷（W×V样÷V样总）
=37.88×(△A-0.0012)÷W
2．按照细胞数量计算
FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷（W×细胞数量÷V样总）
= 37.88×(△A-0.0012)÷细胞数量
3．按照液体体算
FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷V样
= 37.88×(△A-0.0012)
V反总：反应总体积，0.264mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，
g：V样总：加入提取液体积，1mL
订购电话0532-58720157
