植物硝态氮试剂盒说明书
(分光光度法 50T/48S)
测定意义
硝态氮是植物最 要的氮源 植物体内硝态氮含 反映了土壤中硝态氮的供应情况，可作土壤氮肥的指标 测定植物体内的硝态氮含 ， 仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和以植物 原料的加工制品的品质也有重要的意义
测定原理
在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12)呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。
自备实验用品及仪器
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加2mL浓硫酸充分溶解。
试剂二：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1支，4℃保存。
样本处理
按照质量（g）：蒸馏水体积（mL）为1:5～10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水）加入蒸馏水，室温匀浆后置于90℃恒温水浴锅中浸提30min，期间不断晃动或者置于90℃恒温摇床中振荡提取30min，待冷却后于25℃，16000rpm离心15min，取上清待测。（深色植物匀浆后加入约3mg试剂三后再提取）。
测定操作表
| | 空白管 | 空白管 |
| 样本（mL） | | 0.02 |
| 蒸馏水（mL） | 0.02 | |
| 试剂一（mL） | 0.08 | 0.08 |
| 充分混匀，25℃静置30min | ||
| 试剂二（mL） | 1.9 | 1.9 |
| 混匀，25℃静置5min，取1mL玻璃比色皿中测定410nm处吸光值A，△A=A测定管-A空白管 | ||
计算公式
标准曲线：y=0.633x-0.0397，R2=0.9997
NO3-—N含量（ug/g）=（△A+0.0397）÷0633×V反总÷（W×V样÷V样总）
=158×（△A+0.0397）÷W
V反总：反应总体积，2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
注意事项
1、试剂一配制好后尽快使用，4℃可保存一周。
2、试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。
