普通琼脂培养基配制
1、根据用量按比例一次称取各种成分，牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20-30g、蒸馏水1000ml。牛肉膏常用玻璃棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水融化后倒入烧杯。蛋白胨易吸湿，称量时要迅速。
2、在烧杯中加入少于所需的水量，加热，逐一加入各成分，使其溶解，琼脂在溶解煮沸后加入，融化过程需不断搅拌。加热时应注意火力，勿使培养基烧焦或溢出，荣好后，补充所需水分。
3、校正PH值的方法为：取3只与标准比色管(ph7.6)相同的空比色管，其中一管内放蒸馏水5ml，另外两管各加入待测的肉汤培养基5ml，其中一管内加入02%酚红指示剂0.25ml（滴定管），摇匀，按下图所示排列，举起比色架，对光观察。若滴定管色条较淡或为黄色，即表示培养基偏酸性，需滴加0.1mol/L NaOH校正；若呈红色，即表示偏碱性，应滴加0.1mol/L HCL校正；使之与标准色管色泽相同为止。通常未校正前的肉汤均呈酸性。记下用去的NaOH(或HCl)溶液量，由此计算出校正全量培养基时所需NaOH(或HCl)溶液量。
4、趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利于某些实验结果的观察，如无特殊要求时可省去此步骤。
5、按照实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角瓶内。分装时注意勿使培养基沾染在容器口上，以免沾污棉塞引起污染。
①液体分装 分装高度以试管高度的1/4左右为宜，分装三角瓶的量则根据需要而定，一般以不超过三角瓶溶剂的1/2为宜。
②固体分装 分装试管时其装入量不超过试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，斜面长度不超过管长的1/2.分装三角瓶，不超过容量的1/2为宜。分装培养皿，已覆盖培养皿底部厚度2-3mm为宜。
③半固体分装。装入量以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
6 分装完毕后，在使馆口或三角瓶口塞上棉花，以阻止外界微生物进入培养基而造成污染，病保证有良好的通气性能。
7、包扎、灭菌 棉塞上包一层牛皮纸，扎紧，即可进行高压蒸汽灭菌。
8、将灭菌的试管培养基管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度一下不超过试管总长度1/2为宜。
9、灭菌后的培养基放入37℃恒温箱中培养24h，以检验灭菌效果，无污染方可使用。
将灭菌的普通琼脂培养基加热融化，待冷至50℃左右，加入无菌的托纤维绵羊血或家兔鲜血5%混合后，分装灭菌试管后立即白城斜面或倾注于灭菌平皿（如果琼脂温度过高，鲜血加入后则成紫褐色；温度过低，则鲜血加入后琼脂易凝不易混合。注意，混合时切勿产生气泡）。带凝固后，置37℃培养24h，无菌检验合格后方可应用。
无菌血液时用无菌操作方法采集健康动物，通常是绵羊或家兔的血液，加到盛有5%灭菌枸缘酸钠或3%灭菌肝素钠的100ml三角瓶内，或加到盛有玻璃小珠的灭菌三角瓶内摇匀脱纤后置冰箱中代用。
于每只试管中加入2-3g牛肉渣及肉高汤5-6mL，液面盖以一薄层石蜡油，经121.3℃20-30min灭菌后保存于冰箱中备用。词培养基用于厌氧菌的培养，必须注意，在使用时，将肉渣培养基置于水浴锅煮沸10min以驱除管内存留的氧气。
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