ELISA试剂盒检测抗生素
氨基糖类、四环素类、喹诺酮类、硝基呋喃类等。目前国内外可以用ELISA方法检测的抗生素有：氯霉素、链霉素、四环素、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、恩诺沙星、泰乐菌素、磺胺喹恶啉、磺胺二甲基嘧啶、盐霉素、磺胺类、阿维霉素、ELISA试剂盒检测成本低灵敏度高检测限通常可以达到限量要求，是一种理想的初筛方法。但由于ELISA方法存在一定的假阳性率，因此用美联免疫吸附法测定的阳性样品必须做进一步的确定实验。
以氯霉素为例：、
氯霉素是由委内瑞拉链霉素菌产生的一种广谱抗生素，也是第一种用化学合成法生产的抗生素。氯霉素能抑制细菌蛋白质的合成，对革兰氏隐形菌作用较强，敏感菌有大肠杆沙门氏菌，伤寒杆菌，副伤寒杆菌、痢疾杆菌、产气杆菌、肺炎杆菌、链球菌、葡萄球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌、对各种立克次氏体，原虫及部分病毒有顶顶的抑制作用。氯霉素自1948年上市以来一直是治疗伤副伤寒和沙门氏菌 的首选药物。氯霉素内服吸收良好。但注射吸收较慢，主要停滞在局部。吸收后全身分布，并听透过血脑和胎盘屏障。大部分氯霉素在肝中与葡萄糖醛酸结合而失活，少部分降解为芳胺。约10%圆形氯霉素经肾脏排泄，异能通过乳汁分泌。肝或肾功能障碍使消除延长，易发生蓄积中毒。
氯霉素为白色的针状或长片状结晶，味极苦，性能极稳定，熔点150.5℃-151.5℃，水中微溶（0.25%），易溶于甲丙醇、乙酸乙酯等有机溶剂中，水溶剂呈中性反应，在PH10以上可失去活性。干燥晶体可以存放两年以上，在酸碱中加热的条件下能发生水解。氯霉素耐热，水溶液煮沸5H也不失效，由于其结构中有发色基团存在，在275-280nm处有较大吸收峰，故可以直接用紫外检测器检测。
氯霉素作为应用广泛的抗生素，曾对畜禽疾病控制和治疗起到了重要作用，但由于氯霉素存在联众的副作用，能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，动物食品中氯霉素残留对人类的健康构成了巨大的威胁，氯霉素的残留问题引起了国际组织和世界上许多国家和地区的高度重视，欧盟、美国等均在法律规定氯霉素残留限量标准为零容许量，即不得检出，我国农业部2002年12月发布的《动物性食品中兽药最高残留限量》中规定氯霉素的容量为不得检出。
现现在已ELISA试剂盒检测为例介绍；本试剂盒适用于牛奶、肉类、鱼、虾、血清、及蜂蜜中的氯霉素残留量的测定。
（一）测定原理
测定的基础是抗原抗体放映。微孔板包被有针对兔IgG（氯霉素抗体）的羊抗体。加入氯霉素抗体、氯霉素标记物、标准或样品溶液、游离氯霉素与氯霉素酶标记物竞争氯霉素抗体，同时氯霉素抗体与羊抗体连接。没有连接的酶标记物在洗涤步骤中被去除。将酶基质（过氧化尿素）和发色剂（四甲基联苯胺）加入到空中并且孵育。结合的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使眼色由蓝色转变为黄色。在450nm处测量，吸收光强度与样品中的氯霉素浓度成正比
（二）试剂盒指标
特异性
通过对形影的物质进行交叉反应性分析得到
氯霉素 100% 氯霉素碱 0.5% 甲砜霉素 ＜0.05%
余四环霉素 庆大霉素 变暗霉素 无交叉反应
回收率
牛奶＞80% 鱼虾肉＞80%
蜂蜜＞80% 蛋类＞80%
（三）提供的试剂
1、96孔（12条*8孔）包被有氯霉素羊抗体。
2、浓缩标准液；为氯霉素标准溶液。
3、过氧化物酶标记的氯霉素浓缩液：0.7mL
4、氯霉素抗体浓缩液0.7ml
5、基质（7ml)含有氧化尿素
6、四甲基联苯胺（TMB)30%过氧化氢，牛血清白蛋白，图文20等
7、反应停止液1mol/L硫酸
8、缓冲液1:100ml用于标准 酶标记物 抗体 样品稀释
9、缓冲液2：1ml,用于测定牛奶样品时的标准稀释用缓冲液
（四）试剂
1乙酸乙酯
2、异辛烷/三氯甲烷（氯仿）：（2:3）
3、Carrez I :0.36mol/L 亚铁qinghua钾（II）`3H2O
4、Carrez I I:1.04mol/L硫酸锌·7H2O
5、PBS缓冲液：0.55gNaH2PO4·H2O+2.85gNaH2PO4·2H2O+9gNaCl加入蒸馏水至1000ml：ph702
(五）
奶样：
1、取5ml样品支玻璃离心管。
2、4-12℃3500g离心15min如果没有冰冻离心机可预先将样品冷却到8℃
3、转移上层液至新离心管中。
4、取50微升进行测定
稀释倍数 1
检测下限50ng/kg
定量检测限150ng/kg
牛奶
1、取5ml样品支玻璃离心管。
2、15℃、3000r/min离心10min
3、3ml上清液与3ml蒸馏水混合，加入250ulCarrez I及250ulCarrez II和4.5ml乙酸乙酯混合10min
4、15℃、3000r/min离心10min
5、将乙酸乙酯层转移至另一瓶中干燥
6、用1.5ml缓冲液I溶解干燥的残留物，加入1.5ml正乙烷混合。
7、完全除去正乙烷相
8、取出50微升水相惊醒分析
以百分吸光度值为纵坐标，对应氯霉素浓度（ng/kg)的对半数值为横坐标建立标准曲线，教正曲线在50ng/kg-1350ng/kg范围内为线性，相对应每一个样品的浓度（ng/kg）可以从教正曲线上读出，为了获得样品中的氯霉素实际浓度（ng/kg）,从教正曲线上读出的浓度值必须诚意相对应的析湿系数。
