辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒-可见分光光度法100管/96样

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编号	产品名称	检测方法	规格
JSAY15	辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒-可见分光光度法	可见分光光度法	50管/48样

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产品资料：

试剂一：粉剂1×1 瓶，粉剂2×1 瓶，4℃保存；临用前用少量蒸馏水将粉剂1 和粉剂2 溶解后倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，形成NADP+和NADPH 提取液（注：试剂瓶中的粉剂要冲洗干净），4℃保存3 个月；
试剂二：粉剂1×1 瓶，粉剂2×1 瓶，粉剂3×1 瓶，4℃保存；临用前用少量蒸馏水将粉剂1、粉剂2 和粉剂3 溶解后倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至1000mL，形成流动相缓冲液基质（注：试剂瓶中的粉剂要冲洗干净）, 4℃保存3 个月。
试剂三：NADP+标准品5mg×1 支，-20℃保存。加入1mL 试剂一，配成5mg/mL 溶液，现
配现用，用不完的试剂-20℃保存。
试剂四：NADPH 标准品5 mg×1 支，-20℃保存。加入1mL 试剂一，配成5mg/mL 溶液，现配现用，用不完的试剂-20℃保存。

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工作原理：
辅酶ⅡNADP(H)的提取：
组织处理：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 试剂一），进行冰浴匀浆，20000 g，4℃离心30 min，取上清液用0.22μ水系针头式过滤器过滤后待测。
细菌或细胞处理：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量104 个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次），再经20000 g 4℃离心40min，上清用0.22μm 水系微孔滤膜过滤后直接上柱检测。
测定意义：
辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NADP+和NADPH 分别是磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应中主要的氢受体和供体。NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。较高的NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值说明细胞处于较强的磷酸戊糖代谢途径，生物合成能力旺盛，抗氧能力较强。NADPH/NADP+比值升高也可抑磷酸戊糖途径的进行。
标本处理：
称取约 0.1g组织，加入 1mL试剂一，提取 NAD和 NADH，20000 g，4℃
离心 30 min，取上清液用 0.22μm水系针头式过滤器过滤后待测。
细胞处理：收集于 60 mL细胞，离心菌体经高压冷冻干燥 12 h后，加入 2 mL试剂一。
超声破壁细胞(950 W，30%，15 min，工作 1 s，间隔 2 s)，再经 10000 g 4℃离心 40min，上
清用 0.22μm水系微孔滤膜过滤后直接上柱检测。
订购流程：
    1、报价含普票、运费。
    2、常用试剂备货充足，除对温度要求极其严格的产品当天可发货。
    3、进口原装产品要3-6周的货期，详细情况请咨询客服。
    4、订货时间为工作日每周一至周五16:00之前。
    5、如需代为检测，标本对环境温度高，可联系客服安排专人取样（限省内客户）。
    6、代测免收代测费，一周出结果。
    7、产品因运输途中包装破损请拒绝签收，做退回。我们将在24小时之内为您补发损坏产品
    8、如因单位财务制度原因，可申请先发货，报账后付款（此条款仅限医院、学校信誉良好
          客户）。
注意事项：
影响显色反应的主要因素有哪些？
影响显色反应的主要因素有显色剂的用量、溶液的酸度、显色时间以及干扰离子等。
为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，如何选择最适宜的测量条件？
一般从以下几个方面来考虑：
①选择适当的测量波长。一般根据待测组分的吸收光谱选择最大吸收波长作为测量波长。如果干扰组分在最大吸收波长也有吸收,则应根据：吸收大，干扰小”的原则来选择测量波长
②调价溶液的浓度，或选用不同厚度的吸收池，控制被测是呀的吸光度在0.2-0.8范围内。
③选择适当的参比溶液。
在分析复杂样品时，如何消除干扰？
消除干扰方法主要有：
1、加入眼笔记，如加入配位掩蔽剂，使其与干扰离子生成测定波长物吸收的配合物，如加入氧化还原掩蔽剂，改变干扰离子的价态。
2、选择适宜的显色条件，如控制溶液的酸度等，使干扰离子与显色剂不发生反应。3、采用双波长或其他选择性的方法；
4、分离干扰离子。
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