参数规格 产品资料 工作原理 测定意义
编号 | 产品名称 | 检测方法 | 规格 |
KY8 | 柠檬酸合酶(CS)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 |
试剂一:液体 100mL×1瓶,-20℃保存;
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电子名片 |
工作原理:
CS催化乙酰 CoA和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶 A,进一步水解产生柠檬酸;该反应促使无色的 DTNB转变成黄色的 TNB,在 412nm处有特征吸光值。
测定意义:
CS(EC 2.3.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。
标本处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 称取约 0.1g组织或收集 500万细胞,加入 1mL试剂一和 10uL 试剂三,用冰浴匀浆器
或研钵匀浆。
② 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心 10min。
④ 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的 CS(此步可选做)。
⑤ 在步骤④的沉淀中加入 200uL试剂二和 2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率 20%或
200W,超声 3秒,间隔 10秒,重复 30次),用于线粒体 CS测定。
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柠檬酸合酶(CS)测试盒产品图片:
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