参数规格 产品资料 工作原理 测定意义
编号 | 产品名称 | 检测方法 | 规格 |
KY6 | 线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性测试盒 | 微量法 | 100管/96样 |
试剂一:液体100mL×1 瓶,-20℃保存;
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电子名片 |
工作原理:
复合体Ⅰ能够催化NADH 脱氢生成NAD+,在340nm 下测定NADH 的氧化速率计算出该酶
活性的大小。
测定意义:
复合体Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又称NADH-CoQ 还原酶或NADH 脱氢酶,广泛存在于动物、植、
微生物和培养细胞的线粒体中,是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。该酶催化一对电子从
NADH 传递给CoQ,同时可使O2 还原生成O2.-,是呼吸电子传递链上产生O2.-的主要部。
测定该酶活性,不仅可以反映呼吸电子传递链(ETC)状态,而且可以反映活性氧(ROS)生成状态。
标本处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
1 准确称取0.1g 组织或收集500 万细胞,加入1mL 试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆
器或研钵匀浆。
2 将匀浆600g,4℃离心5min。
3 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11100g,4℃离心10min。
4 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选
做)。
5 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL 试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,
功率20%或200W,超声3s,间隔10 秒,重复30 次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。
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线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性测试盒产品图片:
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