(二)悬浮细胞
1 离心收集细胞样品于1.5ml离心管内弃液，加入Hoechst固定液0.5ml,缓缓悬起细胞,固定10min或更长时间(亦可4℃过夜).
2 低速离心去除固定液,用PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体.洗涤时用手晃动数次.
3 低速离心离心后吸去大部分液体保留50ul液体,在缓缓悬起细胞,滴加至载玻片上,尽量使细胞分布均匀.
4 稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动.
5 均匀滴上Hoechst 33258 染色液0.5ml,孵育5分钟.用吸水纸从边缘吸去液体,微晾干.
6 弃染色液,用PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体.洗涤时宜用摇床,或手动晃动.
7 滴一滴抗荧光封片剂于载玻片上,盖上一清洁的盖玻片,尽量避免气泡.
8 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核.激发波长为350nm左右,发射波长为460nm左右.
(三)组织切片
1、常规包埋切片。
2、用PBS或生理盐水洗2次,每次3min.洗涤时手摇晃动数次。
3、均匀滴上Hoechst 33258染色液0.5ml,孵育5分钟。
4、弃染色液,用PBS或生理盐水洗2次.每次3min,吸尽液体.洗涤时宜用摇床,或手动晃动。
5、将切片置于载玻片上,滴一滴抗荧光封片剂,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。
6、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核.激发波长350nm左右，发射波长460nm左右。
注意事项:
1、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测,使用抗荧封片剂时也应避光操作。
2、在为了获得细胞沉淀的离心过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当提高离心力或延长离心时间。
3、Hoechst 33258染色液对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并带一次性手套操作。
有效期:12个月有效。亦可4℃度保存,一个月有效。
四 产品订购说明:
  1、报价含普票、运费。
  2、科研院所常用试剂备货充足，除对温度要求极其严格的产品当天可发货。
  3、进口原装产品要3-6周的货期，详细情况请咨询客服。
  4、订货时间为工作日每周一至周五16:00之前。
  5、如需代为检测，标本对环境温度高，可联系客服安排专人取样（限省内客户）。
  6、代测免收代测费，一周出结果。
五在应用ELISA时，首先应清楚下面的内容 。
  1·是检测抗体还是抗原。 
  2·检测的结果是定性还是定量。 
  3·是否需要检测特异抗体的类型。 
  4·所用抗体/单克隆抗体的亲和力/亲和力怎么样 
 [1]检测抗原
    最常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法，其次是竞争法，但竞争法
  在具体 实验中有些困难;特别是检测微生物的抗原，因为其需标记抗原，对于
  某些抗原很难做到甚至是不可能的。在竞争法中，没标记的抗原与标本直接混合
  在一起，许多标本中含有酶抑制剂或蛋白A样物质（例如粪便），可影响elisa结
 [2]检测抗体 
     检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法，这个方法用于检测特异性
   IgG,IgA盒IgM。这个方法的第一步是因相捕获的抗体是否是特异抗原的抗体。
  间接elisa在家侧IgG时比较简单，但不适用于检测其他种类的抗体。 
方法：不论选用哪种方法ELISA都包括6个步骤
  1·抗原或抗体吸附于固相。 
  2·加标本和试剂。 
  3·孵育和冲洗 
  4·加酶标抗原或抗体。
  5·加适当的底物。 
  6检测和分析结果。
六 合作单位：
  中国医科大学、复旦大学、北京大学、贵阳医学院、中国农业大学
  天津疾控中心、江南大学、山东大学、青岛大学 、香港大学
  云南省产品质量监督检验研究院
七 其他优势产品介绍：